(1)   Pharmacie de l’Hôpital Edouard Herriot, 5 Place d’Arsonval, 69437 Lyon Cedex 03
(2)   Laboratoire d’Hygiène de l’Hôpital Edouard HERRIOT
(3)   Comité de la Qualité de l’Eau et des Solutés pour Hémodialyse (CQESH) des HCL
                                   Hospices Civils de Lyon (HCL) - France
 
Introduction 
La centralisation du dosage des endotoxines bactériennes dans les eaux  de tous les  services d’hémodialyse des HCL a conduit la Pharmacie de l’Hôpital Edouard Herriot (3000 analyses par an) à étudier la conservation des échantillons pour une analyse différée de ces derniers. Les tubes actuels n’étant pas valides pour la conservation, nous avons recherché les tubes et la température optimaux pour une analyse sous quatre jours maximum.  
 
Matériel-méthode 
Deux solutions d’endotoxines bactériennes d’Escherichia coli ont servi pour l’étude : une lyophilisée et une fraîche, chacune à deux concentrations : 0,05 et 0,5UI/ml, après dilutions (et quantification pour la solution fraîche mise au point par le Laboratoire d’Hygiène). A J0 les différentes solutions ont été réparties dans des tubes apyrogènes de trois types : verre borosilicaté avec bouchon en métal vissé (V1), polystyrène fond conique (P2) et verre borosilicaté avec bouchon plastique vissé (V2). Les dilutions d’E.coli lyophilisée n’ont été testées que sur V1 (suite à une étude préliminaire). Les échantillons ont été conservés en parallèle à +6°C et à -25°C. Un dosage par colorimétrie cinétique (sensibilité 0.005UI/ml) a été effectué quatre jours consécutifs.
 
Résultats-discussion 
Pour la solution fraîche de concentration proche de 0.05UI/ml et  conservée à +6°C, de J0 à J4 : la perte est non significative (inférieure à 25%) dans les tubes V1 et V2 (résultats acceptables) ; alors que dans les tubes P2 la perte est significative (supérieure à 25%). A concentration proche de 0.5UI/ml, à +6°C : la perte dans V1 est non significative alors que dans V2 et P2 la perte est significative. A -25°C, la perte est significative pour tous les tubes et toutes les concentrations. Concernant la solution lyophilisée, la perte est non significative pour toutes les températures et concentrations.
 
Conclusion 
Notre étude a validé une conservation possible des échantillons pour une durée maximale de quatre jours dans des tubes en verre : V1 (type EndosafeÒ-Charles Rivers) à  +6°C. Les procédures (prélèvements) du Comité de la Qualité de l’Eau et des Solutés pour Hémodialyse (CQESH) des HCL ont été modifiées et ainsi le planning d’analyse optimisé.
 
Mots-clefs : conservation, endotoxines, hémodialyse, qualité